轉基因品系棉花MON15985 PCR試劑盒實(shí)驗方法步驟

轉基因品系棉花MON15985 PCR試劑盒實(shí)驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

血平板 (成品培養基)規格: 20個(gè)/盒作用： 用于營(yíng)養要求較高的細菌的培養及溶血試驗

哥倫比亞血平板(成品培養基)規格: 20個(gè)/盒作用： 用于一般病原菌的分離培養和溶血性細菌的鑒別

改良克氏雙糖培養基規格: 250g作用： 用于小腸結腸炎耶爾森氏菌的鑒定

硝酸鹽蛋白胨水培養基規格: 250g作用： 用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸鹽產(chǎn)氣試驗

半固體瓊脂規格: 250g作用： 供細菌動(dòng)力觀(guān)察、菌種保存，H抗原位相變異試驗等。(美國FDA、SN、GB)

3%氯化鈉三糖鐵瓊脂規格: 250g作用： 用于副溶血性弧菌的生化反應。(GB、SN)

血瓊脂培養基基礎規格: 250g作用： 加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養基，用于營(yíng)養要求較高的細菌的培養及溶血試驗

尿素瓊脂培養基基礎規格: 250g作用： 用于鑒別腸道菌尿素酶試驗

緩沖動(dòng)力-硝酸鹽培養基規格: 250g作用： 供產(chǎn)氣莢膜梭菌動(dòng)力和硝酸鹽還原測定用

動(dòng)力—硝酸鹽培養基(A法)規格: 250g作用： 供鑒別測定細菌液化明膠用

明膠培養基(營(yíng)養明膠)規格: 100g作用： 供測定細菌液化明膠使用

克氏雙糖鐵瓊脂規格: 250g作用： 用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和乳糖，及產(chǎn)生硫化氫的生化反應。(ISO)

緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養基)規格: 250g作用： 用于MR和VP試驗

Koser氏枸椽酸鹽肉湯規格: 100g作用： 用于細菌的枸櫞酸鹽的試驗

西蒙氏檸檬酸鹽培養基規格: 100g作用： 用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗