轉基因植物Sad1基因核酸檢測試劑盒實(shí)驗要點(diǎn)

轉基因植物Sad1基因核酸檢測試劑盒實(shí)驗要點(diǎn)：
1．CTAB 溶液在低于15℃時(shí)會(huì )析出沉淀，因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預熱。  
2．在適條件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀，很容易一下子就從溶液中鉤出。不過(guò)，某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì)，特別是多糖，使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀，這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
3．飽和酚雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性，但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚的混合液，可減輕這兩種現象，同時(shí)可加入適量的異戊醇（苯酚—異戊醇=25:24:1），異戊醇的作用是消泡，并使蛋白質(zhì)層緊密，使水相和有機相分層較好。 細菌的培養和收集 將含有質(zhì)粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24 小時(shí)。用無(wú)菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12 小時(shí)至對數生長(cháng)后期。小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA 十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿(mǎn)足限制酶切割、電泳分析的需要。

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