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麻疹病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:MMP-9/Gelatinase B檢測試劑盒就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯
產(chǎn)品分類(lèi)
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 麻疹病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Measles VirusRTPCR |
貨號 | LZP6961 |
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
BL21 感受態(tài)細胞0.1 mL×10多少錢(qián)Anti-EXPB-2 研究領(lǐng)域 腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 細胞粘附分子 細胞外基質(zhì)
動(dòng)物細胞裂解液 A50mL說(shuō)明書(shū)Anti-EML3 研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué)
空腸彎曲菌PCR檢測試劑盒免費代測Anti-EDRF1/C10orf137 研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
人核糖核酸酶P基因PCR測定試劑盒保存Anti-Ephrin A2/LERK6 研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
小鼠載脂蛋白B100Elisa Kit品牌Anti-Endostatin/COL18A1 研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué)
豬Apelin(APLN)elisa試劑盒Anti-Estrogen receptor beta 研究領(lǐng)域 細胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號轉導
小鼠17-α甲睪酮(17-αMT)elisa試劑盒Anti-Estrogen receptor beta 研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞粘附分子 細胞外基質(zhì)
豚鼠P物質(zhì)(SP)elisa試劑盒Anti-ET-1 研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞粘附分子 細胞骨架 細胞外基質(zhì)
人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)elisa試劑盒Anti-ERCC1 研究領(lǐng)域 細胞生物 發(fā)育生物學(xué)
人鈣調素特異抗體(CAM-ab)elisa試劑盒Anti-E2F6 研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué)
人百日咳病毒抗體(IgM)elisa試劑盒Anti-EAAT2 研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué)
牛乳過(guò)氧化物酶(LPO)elisa試劑盒Anti-EGFL7 研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 發(fā)育生物學(xué)
大鼠Kelch樣ECH相關(guān)蛋白1(KEAP1)elisa試劑盒Anti-alpha Elastin 研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 發(fā)育生物學(xué)
倉鼠極低密度脂蛋白(VLDL)elisa試劑盒Anti-EDNRA 研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué)
人小梁網(wǎng)細胞價(jià)格Anti-EPH receptor A4 研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 細胞膜蛋白
異綠原酸CCaspase-9 白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原) 大腸桿菌脂多糖IgG
蕓香柚皮苷Caspase-9 白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原) 抗EphA1-R受體IgG
鳶尾黃素AD7C-NTP/NTP/AF peptide 神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽抗原(人) 兔抗人、大、小鼠酪氨酸蛋白激酶受體A2IgG
異麥角甾苷Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10(抗原) 兔抗人、大、小鼠磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受體IgG
原蘇木素BCaspase-13 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13(抗原) 酪氨酸蛋白激酶受體A4IgG
異鼠李素-3-O-新橙CD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19 抗酪氨酸蛋白激酶A4IgG
標準品Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA抗體
異槲皮苷Clenbuterol Hydrochloride/KLH 鹽酸克侖特羅偶聯(lián)血藍蛋白KLH 酪氨酸蛋白激酶受體B2IgG
乙酰紫堇靈Estradiol/BSA 雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白 酪氨酸蛋白激酶受體B6IgG
原花青素B1DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adesine deaminase)N terminal 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原(N端) 紅細胞生成素受體IgG
麻疹病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT,避光1克
大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT1克
大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8°C5克
大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克