龜分枝桿菌PCR檢測試劑盒規格

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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照)，每個(gè)測試反應體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
痰液采集器1個(gè)多少錢(qián)Anti-MMP-17研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞凋亡

GTP 溶液，2.5mM2mL說(shuō)明書(shū)Anti-MPP1/EMP55研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 細胞膜受體

兔NADPH氧化酶1（X1）elisa試劑盒Anti-Morphine研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶

山羊促卵泡素（FSH）elisa試劑盒Anti-MRC1/CD206研究領(lǐng)域  腫瘤 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶

小鼠嗅鞘細胞說(shuō)明書(shū)Anti-MMP24/ MMP25/MMP21研究領(lǐng)域  細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶 細胞分化

RKO-AS45-1（人結腸癌轉基因細胞）說(shuō)明書(shū)Anti-Moesin研究領(lǐng)域  腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 新陳代謝

小鼠肝外膽管上皮細胞*培養基價(jià)格Anti-M-RAS/Mras研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞凋亡

剛果紅試紙保存Anti-MAD1研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 細胞凋亡

4-氨基-3-肼基-5-巰基-1,2,4-三氮唑使用說(shuō)明書(shū)Anti-Microsporidia protien研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶

檸檬酸鈣四物使用說(shuō)明書(shū)Anti-Mtp53(N235K N239Y)研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶

花寶5號使用說(shuō)明書(shū)Anti-MAPK4研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 細胞膜受體

人血小板生成素Elisa Kit說(shuō)明書(shū)Anti-MMP-10研究領(lǐng)域  腫瘤 信號轉導 激酶和磷酸酶

小鼠cAMP反應元件結合蛋白（CREB）elisa試劑盒Anti-Matrilin 1研究領(lǐng)域  腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 新陳代謝

人白介素6（IL-6）elisa試劑盒Anti-MKK7/ERK7研究領(lǐng)域  腫瘤

牛腎上腺素（EPI）elisa試劑盒Anti-MASP2研究領(lǐng)域  腫瘤

D---奎寧酸CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor)  降鈣素受體樣蛋白抗原VCP  含纈酪肽蛋白抗體

梓cRaf/Raf1(c-raf 1)  cRaf/Raf1抗原VCAM-1/CD106/L1CAM  血管內皮細胞粘附分子抗體

根皮苷MEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1)  MEK1/MAPKK1抗體(N-端)VCAM-1  血管內皮細胞粘附分子抗體

蛻皮激素CRF (Corticotropin-Releasing Factor)  促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子VAV3  鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體

6-姜酚;姜辣素;6-姜辣素CSIG(cellular senescence inhibited gene)  細胞衰老抑制基因抗原VAV2  癌基因VAV2抗體

蒿本內酯Cripto-1(N-Terminus)  畸胎瘤衍化生長(cháng)因子抗原(表皮生長(cháng)因子相關(guān)肽)N端VAV1  鳥(niǎo)苷酸轉換因子VAV1抗體

脫氧野尻霉素DNJCripto-1(C-Terminus)  畸胎瘤衍化生長(cháng)因子抗原(表皮生長(cháng)因子相關(guān)肽)C端VAT1L/KIAA1576  突觸小泡膜蛋白同源樣蛋白1抗體

土木香內酯Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii)  環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲(chóng))抗原VAT  囊泡乙酰膽堿通道抗體

檸檬苦素Calcitonin  降鈣素抗原VASP  血管擴張刺激磷蛋白抗體

諾米林CTBP1(C-terminal binding protein 1)  C端結合蛋白1抗原VASH1  血管抑制蛋白1抗體
龜分枝桿菌PCR檢測試劑盒規格雞免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT1克

雞免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃1克

雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：10克

雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：0.5毫升

雞熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

雞*狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT100克

雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃500ul