綿羊星狀病毒型PCR檢測試劑盒價(jià)格

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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照)，每個(gè)測試反應體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
24-Epicastasterone液體石蠟 分子生物學(xué)級2-甲基丁酸乙酯 98%

Brassilide液體石蠟 包埋級乙酸丁香酚酯 98%

6-BA正十二烷基苯 分析標準品，≥99.5% (GC)反-3-己烯酸乙酯  98%

6-KT6-正基-2-硫代尿嘧啶 分析標準品呋喃酮 98%

6-CP全氟辛酸 分析標準品, 用于環(huán)境分析呋喃酮 ≥98%, FCC, FG

6-MP2,4,6-三磺酸 5 % (w/v) 溶液呋喃酮 natural, ≥98%, FG

Purine2-基硫 96%檸檬 97%

Guanine姥鮫烷 98%檸檬 97%， FCC, Kosher

Guanine HC14-(1-吡咯烷)苯甲 97%香葉  98%

8-Azaguanine聚苯乙烯，1000 分析標準品香葉  97%

Xanthine聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-馬來(lái)酸)鈉鹽 摩爾比率3:1香葉  Standard for GC, ≥99.0% (GC)

Hypoxanthine聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-馬來(lái)酸)鈉鹽 摩爾比率1:1乙酸香葉酯 96%

4-Ami-PGA藍VF Indicator乙酸香葉酯 90%，天然, FCC, Kosher

MTX乙酸苯酯 99%香葉基酮 97%

2-IP撲草凈 分析標準品，99%甲酸香葉酯 85%

N6-Benzoyladenine撲草凈標準溶液 10μg/ml,u=6% 甲酸香葉酯 85%,FCC, Kosher

雌酚酮/雌酮WBP2 AntibodySCUBE1  新型血小板相關(guān)血管內皮分泌蛋白SCUBE1抗體

雌酚酮/雌酮（標準品）USP8 (D18F6) Rabbit mAbSCRO/DCUN1D1  鱗狀細胞癌相關(guān)蛋白抗體

鹽酸克林霉素FGF Receptor 2 (D4H9) Rabbit mAbSCP3  聯(lián)會(huì )復合體蛋白3抗體

鹽酸克林霉素(標準品)Cell Fractionation Antibody Sampler KitSCP2/NLTP  固攜帶蛋白2抗體

鹽酸維拉帕米HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb (Magnetic Bead Conjugate)SCNN1D/δENaC  上皮鈉離子通道蛋白D抗體

鹽酸維拉帕米（標準品）GST (26H1) Mouse mAb (Magnetic Bead Conjugate)SCNN1B/βENaC  上皮鈉通道β抗體

霉酚酸; 麥考酚酸;MPAAkt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (Magnetic Bead Conjugate)SCN9A/NAV1.7  電壓開(kāi)啟的鈉離子通道SCN9A抗體

霉酚酸; 麥考酚酸（標準品）PAX5 (D19F8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)SCN8A/Nav1.6  鈉通道蛋白8α抗體

阿莫西林/羥氨芐青霉素p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)SCN3B  電壓門(mén)控鈉通道SCN3B蛋白抗體

阿莫西林（標準品）Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)SCN2A  SCN2A抗體
綿羊星狀病毒型PCR檢測試劑盒價(jià)格人結核菌桿抗體IgG(TB-AbIgG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：100毫克

人睫狀神經(jīng)營(yíng)養因子(CNTF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃，避光250毫克

人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：5克

人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT500毫升

人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT1克

人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT5克

人金葡菌腸毒素(SE)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT500毫克

人金屬蛋白(MT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT10克