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普氏立克次氏體PCR檢測試劑盒價(jià)格

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

普氏立克次氏體PCR檢測試劑盒價(jià)格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
rT3檢測試劑盒 TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色

更新時(shí)間:2021-03-13
訪(fǎng)問(wèn)次數:416

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產(chǎn)品名稱(chēng)

 普氏立克次氏體PCR檢測試劑盒價(jià)格

 英文名稱(chēng)

 Rickettsia prowazekiiPCR

 貨號

 LZP7233

實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Sodium Danshensu伏草隆 分析標準品磷鉬酸銨 AR,96.5%

Puerarin氯甲酸異酯  97%三乙基芐基氯化銨 98%

Saikosaponin A異隆 分析標準品,99.5%磷鉬酸 AR

Saikosaponin B1利谷隆 分析標準品聚烯酸鈉 average Mw 500萬(wàn)-700萬(wàn) ,80目

Saikosaponin C氯甲 98%()聚烯酸鈉 average Mw 400萬(wàn)-500萬(wàn)

Saikosaponin D綠谷隆 分析標準品四丁基溴化銨 AR,99.0%

Baicalin氯甲酸正酯 99%4-乙酰氧基苯甲酸  99%

Baicalein氯甲酸苯酯 98%4-基苯甲酸 98%

Scutellarin甲基托布津 分析標準品檸酸 97%(T)

Wogoside正  ACS, ≥99.5%4-乙 98%

Alkaline transfer solution2,4-二氯苯胺 99%L-(-)樟腦磺酸 99%

1-Ami-2-naphthol-4-sulfonic acid(S)-4-芐基-2-惡唑烷酮  99%D(+)樟腦磺酸  99%

Ammonium bitartrate(R)-4-芐基-2-惡唑烷酮   99%(±)-樟腦-10-磺酸 99%

Amygdalin乙酰氨基二酸二乙酯  98%甲基烯酸烯酯, 包含50-185 ppm MEHQ穩定劑, 98%

Phenylhydrazine hydrochloride對羥基苯酮  98%甲基烯酸芐基酯 98%

Azomethine-H mosodium salt hydrate(S)-4-異基-2-惡唑烷酮 98%二甲基烯酸1,3-丁二酯, 含200 ppm MEHQ穩定劑, 95%

十二烷基硫酸鈉(分子生物學(xué)級)Toll-like Receptor 4 (D8L5W) Rabbit mAb (Mouse Specific)PIRH2  泛素連接酶抗體

聚乙二6000TrkA Blocking PeptidePinin  橋粒相關(guān)蛋白DRS抗體

吐溫20MED12 (D9K5J) Rabbit mAbPin1  肽基脯氨酞順?lè )串悩嬅窹inl抗體

5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸環(huán)己胺鹽(X-GLUC)IGF-II Receptor/CI-M6PR (D3V8C) Rabbit mAbPIM3  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PIM3抗體

曲拉通X-100Rab38 (D2V9Z) Rabbit mAbPIM1  絲氨酸/蘇氨酸激酶蛋白Pim1抗體

胰蛋白胨COMT (D4N6M) Rabbit mAbPILR beta  細胞表面受體PILRβ抗體

生物素;D-生物素;維生素 H 輔酶 ROLFM4 (D1E4M) XP® Rabbit mAbPILR beta  細胞表面受體PILRβ抗體

甘油OLFM4 (D1E4M) XP® Rabbit mAbPIK3CA  磷脂酰肌激酶催化亞單位A抗體

檸檬酸鈉二;檸檬酸三鈉二Phospho-CDK Substrate [pTPXK] (D9V5N) Rabbit mAbPIK3C3/PI3 kinase type 3  磷脂酰肌激酶3催化亞單位3抗體

KPNA2 AntibodyPIH1D1/P17  核仁同源蛋白17抗體
普氏立克次氏體PCR檢測試劑盒價(jià)格兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT100克

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500克

兔腎素(Renin)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1ml*4支

兔雙(DHT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

兔糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1米

兔纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:20毫升

兔纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

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