解沒(méi)食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家

組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

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實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照)，每個(gè)測試反應體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
Wilfortrine釩粉 99.9% metals basis,100-200 mesh新綠原酸 分析標準品，≥99%

Xanthatin質(zhì)釩標樣 995 - 1005 ug/ml V(3+) 的 2% H3溶液 (20°C)新綠原酸 99%

Xanthinin五二釩 99.99% metals basis（）橄欖苦苷  分析標準品，≥98%(HPLC)

Zederone氧化釔 SP番瀉苷C 99%

Zedoarofuran硝酸氧鋯 合物 SP亞麻木酚素 分析標準品，≥98%

Zedoarondiol硝酸氧鋯 合物 99.99% metals basis雷公藤乙素  分析標準品，≥98%

3,5,9-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one氧化鋅 SP牡荊素鼠李糖苷  分析標準品，≥98%

3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene鋅粉 SP牡荊素鼠李糖苷  98%

3,5-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one鋅粒 SP雷公藤內酯甲  分析標準品，98%

3,7,16-Trihydroxystigmast-5-ene硫代乙酸 98%雷公藤內酯甲  98%

3-beta-Hydroxyergost-5-en-7-one硫代乙酸 95%燦爛甲酚藍 試劑級

3beta-Hydroxyporiferast-5-en-7-one氨芐青霉素，三 分析標準品羥基萘酚藍 IND,94%(HPLC)

4-Beta-Hydroxycholesterol苯甲 分析標準品，≥99.9% (GC)羥基萘酚藍二鈉鹽 ACS

5,8-Epidioxyergosta-6,9(11),22-trien-3-ol硫酸安普霉素 分析標準品異胺 >99.0%(GC)

6,7-Dihydroneridiene A甲草胺 分析標準品，95.5%二異胺 98%

6beta-Hydroxystigmast-4-en-3-one氟菊酯 分析標準品N-甲基二乙胺 98%

氘代苯-D6(0.5ml x 10 )Ribosomal Protein L7a (E109) Antibodyphospho-CREB-1(Ser133)  磷酸化CREB-1抗體

氘代苯-D6(0.55ml x 10)Phospho-β-Arrestin 1 (Ser412) (6-24) Mouse mAbphospho-CREB-1(Ser129)  磷酸化CREB-1抗體

氘代苯-D6(10g )Phospho-PDGF Receptor α (Tyr762) (D9B1N) Rabbit mAbphospho-CREB-1(Ser121)  磷酸化CREB-1抗體

氘代苯-D6(10g )Lamin B2 (E1S1Q) Rabbit mAb (HRP Conjugate)phospho-c-Raf(Tyr341)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘代苯-D6(25g)tch2 (8A1) Rabbit mAbphospho-c-Raf(Thr269)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘代苯-D6(50g)tch4 (L5C5) Mouse mAbphospho-c-Raf(Ser494)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘代苯-D6(100g )eIF4A (F52) Antibodyphospho-c-Raf(Ser471)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘氧化鈉-d(10g )CD3 (17A2) Rat mAb (APC Conjugate)phospho-c-Raf(Ser462)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘氧化鈉-d(50g )PHB1 Antibodyphospho-c-Raf(Ser43)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體

氘代三(0.50 mL x 10 )PHB1 Antibodyphospho-c-Raf(Ser339)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體
解沒(méi)食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

豬促生長(cháng)激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

豬促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

豬單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT5克

豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT25克

豬低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：1克

豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：250克

豬地塞米松(Dex)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT50克