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活動(dòng)錐蟲(chóng)PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

活動(dòng)錐蟲(chóng)PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
AT2R-Ab檢測試劑盒標記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。c

更新時(shí)間:2021-03-13
訪(fǎng)問(wèn)次數:316

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產(chǎn)品名稱(chēng)

 活動(dòng)錐蟲(chóng)PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家

 英文名稱(chēng)

 Trypanosoma vivaxPCR

 貨號

 LZP7438

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
γ-CyclodextrinDL-α-氨基異丁酸  98%氯菊酯標準溶液 100μg/ml,u=3%

D-FructoseD-氨酸芐酯對甲苯磺酸鹽 98%氯菊酯標準溶液 10μg/ml,u=6%

F6PN-乙酰-L-蛋氨酸 98.5%百菌清 分析標準品,99%

FDPN-乙酰-L-酪氨酸乙酯 98%百菌清標準溶液 100μg/ml,u=4%

D-Galactosamine HC13-(乙酰胺甲硫基)酸   98%百菌清標準溶液 10μg/ml,u=6%

D-(+)-Galacturonic acidL-氨酸4-硝基酰苯胺鹽酸鹽 99%氯磺隆 分析標準品,92%

D-Glucose mohydrateD-氨酰胺鹽酸鹽 98%氯嘧磺隆 分析標準品,98.5%

D-Glucose anhydrousL-天冬氨酸二叔丁基酯鹽酸鹽 99%滅蠅胺 分析標準品,99.5%

G-6-P-Na3N-叔丁氧羰基-N'-(2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺?;?-L-精滅蠅胺標準溶液 100μg/ml,u=2%

G-6-P-Na2Fmoc-氨基酸-王樹(shù)脂  100-200 mesh, 1%DVB,Substitution 0.3-0.滅蠅胺標準溶液 10μg/ml,u=2%

G-6-P-NaAmiMethyl Polystyrene Resin 0.5~1.5 mmol/g, 100~200 mesh草津 分析標準品,98%

G-1-P-Na2BETA淀粉樣蛋白片段1-40   ≥90% (HPLC), powder霜脲 分析標準品,98.5%

6-PG-Ba[Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate ≥97% (HPLC)順式氯菊酯  分析標準品,99%

D-Glucosamine HC1Activity-Dependent Neuroprotective Protein Fragment74-81 97%四螨 分析標準品,98.6%

D-GlcNAcN-Acetyl-Ile-Glu-Pro-Asp-p-nitroanilide ≥97% (HPLC)四螨標準溶液 100μg/ml,u=4%

D-cellbiose絲拉克肽 ≥97% (HPLC)四螨標準溶液 10μg/ml,u=6%

正庚烷(無(wú)級,99%)E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)MUL1/RNF218  E3泛素連接酶MUL1抗體

三十六烷(standard for GC,≥98.0%(GC))SynGAP Antibodymucin3/Muc3  粘蛋白-3抗體

三十六烷(分析標準品,≥99.0%(GC))Yes Antibodymucin 5B/Muc5B  粘蛋白-5B抗體

alpha-六六六標準溶液(100μg/ml,u=3%)eS (D9A5L) Rabbit mAbMucin 4/Muc4  粘蛋白-4抗體

alpha-六六六標準溶液(10μg/ml,u=6%)Androgen Receptor AntibodyMucin 4/Muc4  粘蛋白-4抗體

alpha-六六六標準溶液(50μg/mL,分析標準品)CDK9 (C12F7) Rabbit mAb (PE Conjugate)MUC7  粘蛋白7抗體

正十六烷(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-IRS-1 (Ser612) (C15H5) Rabbit mAbMUC5AC/Mucin 5AC  胃粘液素抗體

正十六烷(分析標準品,≥99.5%(GC))Phospho-IRS-1 (Ser612) (C15H5) Rabbit mAbMuc2  粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體

正己(Standard for GC,>99.5%(GC))Pyruvate Dehydrogenase (C54G1) Rabbit mAbMUC15  粘蛋白15抗體

正己(分析標準品,>99.8%(GC))Pyruvate Dehydrogenase (C54G1) Rabbit mAbMUC13  粘蛋白13抗體
活動(dòng)錐蟲(chóng)PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家HER2抗體Chlorovaltrate K中文名:別名:分子式:C22H33ClO8

絨毛膜促性腺激素β亞基單抗Valeriandoid B中文名:別名:Chlorovaltrate M分子式:C24H33ClO10

類(lèi)狀瘤病毒18 E6抗體Volvaltrate B中文名:別名:分子式:C27H41ClO11

核基質(zhì)p84蛋白抗體IVHD-valtrate中文名:別名:Isovaleroxyhydroxydidrovaltrate分子式:C27H40O11

甲型流感病毒血凝素抗體(H2N2)Didrovaltrate中文名:別名:Dihydrovaltrate分子式:C22H32O8
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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