CLDN14水閘蛋白14ELISA試劑盒

產(chǎn)品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

標本要求：

1．標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(cháng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實(shí)驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

大鼠單核趨化蛋白3(MCP-3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒水楊鈉硝鎘,四水 CP,98.5%色度標準溶液 500度，溶劑：10％HCl

大鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒磺水楊硝鎘,四水 ACS間酚標準溶液 0.98mg/ml，體：

大鼠Smad同源物1(Smad1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒磺水楊鈉電解銅粉 CP銅溶液：0.50/1.00/3.00/5.00µg/mL，鎘溶液：0.5/1.00/3.0

大鼠Smad同源物4(Smad4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,5-二電解銅粉  99.9% metals basis鎘單元素標準溶液1000ug/ml,體: 1%硝

大鼠胃動(dòng)素(MTL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒正辛膽固 AR,>95.0%(GC)鉻單元素標準溶液1000ug/mL,體: 5%鹽

大鼠抗繆勒管激素(AMH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒二膽固 分析標準品，99.0%鈷單元素標準溶液1000ug/ml,體: 1%硝

大鼠蕈型乙酰膽受體(M-AChR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒二膽固 >97.0%(GC)銅單元素標準溶液1000ug/ml,體: 1%硝

大鼠髓鞘性蛋白(MBP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒化鈣膽固 99%水中鈣鎂成分分析標準物質(zhì)Ca：696.2mg/L Mg:298.8mg/L 硬度:2968

大鼠晚期糖化終末產(chǎn)物受體(AGER)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  無(wú)水化鈣膽固 98%水中鈣鎂成分分析標準物質(zhì) Ca：20602mg/L  Mg:77.252mg/L 硬度:5

大鼠食欲素B/阿立新B(OXB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒化鈷膽固 用于培養，99%（GC)水中鈣鎂成分分析標準物質(zhì) Ca:2858mg/L Mg:90.50mg/L 硬度:7510m

大鼠磷張力蛋白同源物(PTEN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 化鋰氟化鈣 CP,98.0%水中成分分析標準物質(zhì) 59μg/mL，體:0.1mol/L NaOH

大鼠肌球蛋白(MYS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒無(wú)水化鋰氟化鈣 AR,99.5%化學(xué)耗氧量(需氧量)成分分析標準物質(zhì) 1000mg/L,體:0.1NH2SO4

大鼠N -乙酰-β-D-氨葡萄糖(NAGase)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒化亞銅氟化鈣 光譜純化學(xué)耗氧量分析標準物質(zhì) 226mg/L，體：水

大鼠N-乙酰半乳糖-6-硫酯(GAS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒氟化鈣 99.99% metals basis化學(xué)需氧量標準物質(zhì)100mg/L

大鼠新生狀腺素(NN-T4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒化磷三鈣 CP,97%化學(xué)需氧量標準物質(zhì)224mg/L

大鼠神經(jīng)生長(cháng)因子(NGF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒化鎂磷三鈣 AR, ≥96.0%化學(xué)需氧量標準物質(zhì)4940mg/L
CLDN14水閘蛋白14ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：AZD3965

產(chǎn)品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

AZD3965是一種選擇性的MCT1抑制劑，抑制MCT1，Ki為1.6nM。比作用于MCT2選擇性高6倍，濃度高達10μM，也不抑制MCT3和4。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

*：1448671-31-5

純度：99.67%

分子量：515.51

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內使用。

操作步驟：

1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。