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NAD+含量加入底物后,反應的時(shí)間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗臺上,以便 不時(shí)觀(guān)察,待對照管顯色適當時(shí),即可終止酶反應。
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
NAD+含量 | 0.2g或者0.2mL | LZ-S63210 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/(比色測定波長(cháng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:血清(漿)可直接測定。紅細胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。=
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說(shuō)明書(shū)。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時(shí)間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗臺上,以便 不時(shí)觀(guān)察,待對照管顯色適當時(shí),即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應步驟,但卻 是決定實(shí)驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線(xiàn)粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
小鼠雄激素結合蛋白(mouse ABP) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(mouse ACTH) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Active Caspase-3 ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Active Caspase-7 ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Active Caspase-8 ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠激活素A(mouse Activin A) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠脂聯(lián)素(mouse Adiponectin) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠抗線(xiàn)粒體抗體(mouse AMA) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠抗核抗體(mouse ANA) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠血管緊張素II(mouse ANG II) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠心鈉素(mouse ANP) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠凋亡誘導因子(mouse AIF) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠抗利尿激素/血管加壓素(mouse AVP/ADH) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠醛固酮(mouse ALD) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠白蛋白(mouse Albumin) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠載脂蛋白E(mouse APO E) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠B淋巴細胞刺激因子(mouse BAFF) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠細胞凋亡相關(guān)基因(mouse BCL-2) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠腦衍化神經(jīng)營(yíng)養因子(mouse BDNF) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠腦衍化神經(jīng)營(yíng)養因子受體(mouse BDNF R) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠骨成型蛋白受體1A(mouse BMP-R1A) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠腦鈉肽(mouse BNP) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠N端前腦鈉素(mouse NT-proBNP) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠CXCL3(mouse CXCL-3) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠CXCR4(mouse CXCR-4) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠皮質(zhì)酮(mouse Corticosterone) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
錨蛋白重復域6抗體
精氨酸酶2抗體
醛固酮還原酶家族1成員C3抗體
促腎上腺皮質(zhì)激素受體
褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體
腎上腺皮質(zhì)線(xiàn)粒體鐵氧還蛋白抗體
Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體
腺相關(guān)病毒5 VP1抗體
脂肪醛脫氫酶抗體
抗利尿激素1A抗體
抗利尿激素受體1B抗體
二磷酸腺苷核糖基化因子鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子2抗體
α增強子結合蛋白1抗體
脊髓小腦共濟失調10抗體
蛋白激酶A錨定蛋白7抗體
腺苷三磷酸結合盒轉運體12抗體
腺苷三磷酸結合盒轉運體9抗體
三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白4抗體
肌動(dòng)蛋白結合蛋白LIM3抗體
高爾基復合體相關(guān)蛋白1抗體
乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體
腺嘌呤核苷酸轉運蛋白1、2、3、4抗體
去整合素樣金屬蛋白酶12
磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體
膜粘連蛋白2受體抗體
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體
ADCK5蛋白抗體
艾滋病病毒復制結合蛋白抗體
AFP4b蛋白抗體
HIV-1病毒復制結合蛋白2抗體
伴侶蛋白bc1同源復合體抗體
心肌錨蛋白重復結構域1抗體
抑制蛋白結構域蛋白1抗體
抑制蛋白結構域蛋白2抗體
抑制蛋白結構域蛋白3抗體
抑制蛋白結構域蛋白4抗體
雌二醇抗體
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體
NAD+含量轉錄激活蛋白crsp70抗體
卵巢、胎盤(pán)、前列腺、睪丸蛋白22抗體
錨蛋白重復結構域蛋白33B抗體
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用