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乙酰膽堿轉移酶(ChAT)活性測定試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

乙酰膽堿轉移酶(ChAT)活性測定試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品:
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1號染色體開(kāi)放閱讀框177抗體Phospho-PDK1 (Ser241) 磷酸化3磷酸肌依賴(lài)性蛋白激酶1

更新時(shí)間:2021-08-30
訪(fǎng)問(wèn)次數:545

特點(diǎn):
      1、優(yōu)化設計的實(shí)驗方案,1小時(shí)即可完成
      2、靈敏度高,操作便捷
      3、試劑盒提供檢測所需的全套試劑

產(chǎn)品名稱(chēng)

乙酰膽堿轉移酶(ChAT)活性測定試劑盒

規格

詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)

貨號

LZ-S64400

儀器:
1、分光光度計/酶標儀/(比色測定波長(cháng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器

產(chǎn)品僅用于科研樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn)為:
1)應用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機物和有機物在紫外可見(jiàn)區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
2)靈敏度高
由于相應學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò )合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿(mǎn)意的方法了。
4)準確度高
對于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速 。
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操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

 


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