己糖激酶（HK）活性測定試劑盒

產(chǎn)品僅用于科研樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。

特點(diǎn)：
      1、優(yōu)化設計的實(shí)驗方案，1小時(shí)即可完成
      2、靈敏度高，操作便捷
      3、試劑盒提供檢測所需的全套試劑
儀器：
1、分光光度計/酶標儀/（比色測定波長(cháng)為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器

樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達2.000ml。
2）. 過(guò)濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （過(guò)過(guò)濾）。
4 ）. 過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn)為：
（1）應用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機物和有機物在紫外可見(jiàn)區都有吸收，因此均可借此法加以測定。到目前為止，幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素（除少數放射性元素和惰性元素之外）均可采用此法。
（2）靈敏度高
由于相應學(xué)科的發(fā)展，使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展，從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò )合物和各種表面活性劑的應用研究，使許多元素的摩爾吸光系數由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對于其它痕量分析方法而言，光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用，在標準參考物質(zhì)的研制中，它更受重視，很多光度分析法已制定成為標準方法。
（3）選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進(jìn)行光度法測定，如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定，已有比較滿(mǎn)意的方法了。
（4）準確度高
對于一般的分光光度法來(lái)說(shuō)，其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內，如采用示差分光度法測量，則誤差往往可減少到千分之幾。
（5）適用濃度范圍廣
可從常量（1-50%）（尤其是使用示差法）到痕量（10-6-10-8%）（經(jīng)預富集后）。
（6）分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速 。
操作流程：
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。
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