INHBA抑制素β-AELISA試劑盒

樣本實(shí)驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

產(chǎn)品屬性：

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

操作步驟：

1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

標本要求：

1．標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(cháng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

補體調節蛋白(CCP)試劑盒 (-)-vibo-環(huán)己五四氫氧化銨 AR,25%水溶液對酚 AR

血小板性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒 (-)-白花前胡素四氫氧化銨 AR,25%溶液對酚 分析標準品, ≥99.5% (HPLC)

血小板性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒 (-)-白花前胡乙素四氫氧化銨溶液 10%水溶液對酚標準溶液 1000μg/ml，溶劑：

類(lèi)白抗原C(HLA-C)試劑盒(-)-白玉蘭亭B四氫氧化銨溶液 10%溶液對酚標準溶液1.00mg/ml，體：

類(lèi)白抗原C(HLA-C)試劑盒(-)-表阿夫兒茶精四乙 98%對酚標準溶液1009mg/L,溶劑:

類(lèi)白抗原E(HLA-E)試劑盒(-)-莰四乙 for ion pair chromatography對酚 >99.0% (GC)

類(lèi)白抗原E(HLA-E)試劑盒(-)-紫堇明四氫氧化銨 五水合物 97%黃芪 分析標準品，≥98%

類(lèi)白抗原A(HLA-A)試劑盒(E)-3-羥-5-氧二苯乙烯四乙 99%高良姜素 98%

類(lèi)白抗原A(HLA-A)試劑盒(E)-3-乙酰氧-5-氧二苯乙烯四乙化銨 98%高良姜素 分析標準品，≥99%

血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒 (E)-阿魏二十六鹽(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧  97%京尼平 98%

血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒 (S,E)-癸-2,9-二烯-4,6-二炔-1,8-二異丁酰乙乙酯 98%京尼平甙  分析標準品，≥98%

甘露糖凝集素受體(MBLR)試劑盒 （Z）-阿枯米定對氟苯 98%叔丁二硅烷 97%

甘露糖凝集素受體(MBLR)試劑盒 (二氫)黃柏甙4-氟苯 98%叔丁二硅烷溶液 50%苯溶液

纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)試劑盒 1,18-十八烷二3-氟苯 98%N,O-雙(三硅烷)三氟 96%

纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)試劑盒 1,2:4,5-二-o-異亞-beta-d-吡喃果糖2-氟苯 98%N,O-雙(三硅烷)三氟乙酰 for GC, ≥99.0% (GC)

B受體(BCR)試劑盒 1,2-O-異亞-beta-D-吡喃果糖3-氟苯 97%N,O-雙(三硅烷)三氟 99% BSTFA + 1% TMCS
INHBA抑制素β-AELISA試劑盒M13線(xiàn)粒體超氧化物染色/檢測試劑盒是利用M系列探針進(jìn)行線(xiàn)粒體超氧化物特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的M13線(xiàn)粒體超氧化物染色探針為紅色熒光標記的線(xiàn)粒體探針，具有510/580nm 的大激發(fā)/發(fā)射波長(cháng)。

M13線(xiàn)粒體超氧化物染色探針是一種細胞滲透型的對活細胞中的線(xiàn)粒體體進(jìn)行選擇性染色的一類(lèi)新型熒光染料，該探針可以選擇性標記線(xiàn)粒體，包含標記線(xiàn)粒體的弱巰基反應性的氯甲基官能團。只需簡(jiǎn)單孵育細胞，即可穿過(guò)細胞膜并直接聚集在活性線(xiàn)粒體上。一旦進(jìn)入線(xiàn)粒體后，快速被超氧化物氧化，并產(chǎn)生紅色熒光。M13線(xiàn)粒體超氧化物染色探針只可被超氧化物氧化，而不被其他活性氧類(lèi)(ROS)和活性氮類(lèi)(RNS)氧化。氧化產(chǎn)物結合核后，可產(chǎn)生大量紅色熒光。

儲存條件：染料-20℃避光保存；避免反復凍融；稀釋液2-8℃保存。

按每個(gè)樣用200μl染料計，試劑盒可以做30-150個(gè)樣或60-300個(gè)樣；

按每個(gè)樣用100μl染料計，試劑盒可以做60-300個(gè)樣或120-600個(gè)樣。

有效期：六個(gè)月。