Hp-IgM幽門(mén)螺旋桿菌IgMELISA試劑盒

樣本實(shí)驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

產(chǎn)品屬性：

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

操作步驟：

1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

標本要求：

1．標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(cháng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

凝聚素(CLU)試劑盒雀舌黃楊B2--3-吡啶-5- 95%2-硫 96%

凝聚素(CLU)試劑盒肉桂肉桂酯2-吡啶-4- 97%乙硫噻唑 99%

OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)試劑盒 軟木花椒素5-噻吩-2-  97%2-(三硅)苯三氟磺鹽 97%

OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)試劑盒 軟脂-β-香樹(shù)精酯2-吡啶-5-頻哪酯 98% 茶螺烷 technical, ≥90% (GC,mixture of isomers)

抗著(zhù)絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)試劑盒軟脂谷甾酯2,6-二氟苯 98%二噻吩二硫 97%

抗著(zhù)絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)試劑盒蕊木酯2,6-二氟吡啶-3- 95%季 96%

肌生成素(MYOG)試劑盒薩杷晉2,5-二  97%乙香蘭素酯 98%

肌生成素(MYOG)試劑盒三裂尾草素（供應商少）2,4-二氟苯  98%異丁香蘭素酯 ≥98%, FG

A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)試劑盒三七草酰 II2,5-二氟苯 97%香蘭丁 96%

A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)試劑盒三十碳六烯-2,3-二2,3-二吡啶-4- 95%香草 98%

活化蛋白C抵抗素(APCR)試劑盒三萜 A4-(二氨)苯 95%反式-1,2-環(huán)己二 98%

活化蛋白C抵抗素(APCR)試劑盒三乙柚皮素酯2,6-二吡啶-3- 95% 1，2-環(huán)己二 99%

N端外顯肽(Ext-N)試劑盒桑橙素2,5-二吡啶-3- 95%反式-1，2-環(huán)己二四乙,一水 99%

N端外顯肽(Ext-N)試劑盒桑根皮2,5-二吡啶-4- 95% 98%

分泌成分(SC)試劑盒桑皮黃素，桑黃2,6-二 98%反式-1.2-環(huán)己二四乙 98%

分泌成分(SC)試劑盒沙紙寧C2,4-二氧嘧啶-5- 90% Pt, 65%
Hp-IgM幽門(mén)螺旋桿菌IgMELISA試劑盒含鐵血黃素(hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素，為金黃色或棕黃色顆粒，因其含鐵、金黃色，故稱(chēng)為含鐵血黃素。當紅細胞被巨噬細胞吞噬后，在溶酶體酶的作用下，血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。

Perls染色普魯士藍反應(Prussian blue reaction)又稱(chēng)為含鐵血黃素染色，即經(jīng)過(guò)處理后可以產(chǎn)生藍色，常見(jiàn)于吞噬細胞內或間質(zhì)內，主要顯示三價(jià)鐵鹽。Perls 普魯士藍是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應，是顯示組織內三價(jià)鐵的一種敏感、傳統優(yōu)良的方法，在反應后可用紅色染色劑進(jìn)行復染，如核固紅、中性紅等。

Perls 普魯士藍染色試劑盒常用于顯示局部組織內的各種出血性病變。在判斷含鐵血黃素沉積時(shí)，用Perls染色可以得到證實(shí)，可以很好的區分含鐵血黃素和其他色素。本試劑盒穩定性好，可以長(cháng)期保存，應用范圍廣。

本試劑盒復染液采用經(jīng)典常用的核固紅復染液。

儲存條件：室溫避光保存。

有效期：一年。