AP-1轉錄因子1ELISA試劑盒

標本要求：

1．標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

產(chǎn)品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(cháng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實(shí)驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

操作步驟：

1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

凋亡信號調節激I(ASK-1)試劑盒槲皮素-3-O-β-D-葡糖糖-7-O-β-D-龍膽雙糖G 95%羥酪  98%

凋亡信號調節激I(ASK-1)試劑盒槲皮素-3-龍膽二糖甙G 分析標準品，用于食品分析，≥97.0% (HPLC)常春藤皂元 分析標準品，≥98%

凋亡信號調節激I(ASK-1)試劑盒槲皮素7-O-α-L鼠李糖二胂鈉 分析標準品羥A  分析標準品，≥98%

凋亡信號調節激I(ASK-1)試劑盒槲皮素-7-O-葡萄糖二二硫代氨鈉 98%素 分析標準品，≥98%

Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 虎掌草皂甙D三氟磺鈧 98%鹽石蒜 96%(HPLC)

Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 虎杖磷氫二鈉,二水 for HPLC, ≥99%(T)鹽石蒜 分析標準品，≥98%

轉移因子(TF)試劑盒 琥珀十二烷硫鈉 99.0%，超純級羽扇豆 分析標準品，≥98%

轉移因子(TF)試劑盒 花柏吡咯烷二硫代鈉 80%羅漢果V  分析標準品，≥98%

結腸癌抗原(CCA)試劑盒花柏烯甜蜜素 分析標準品羅漢果V  98%

結腸癌抗原(CCA)試劑盒花椒酚苯氧乙鈉 98%橄欖苦  分析標準品，≥98%(HPLC)

H-ras 試劑盒花椒素鈉 90%安石榴  98%

H-ras 試劑盒花旗松素無(wú)水碳鈉 99.9999% metals basis紫丁香 分析標準品，≥98%

c-sis 試劑盒花生四烯化亞錫 SP野 分析標準品

c-sis 試劑盒華蟾它靈化亞錫 ≥99.999% metals basis花旗松素 分析標準品，≥98%

c-jun 試劑盒華蟾酥蔗糖 分析標準品蔓荊子黃素 分析標準品，≥98%(HPLC)

c-jun 試劑盒槐定 單硬脂甘油酯 99%(GC)二苯胍 97%
AP-1轉錄因子1ELISA試劑盒細菌活性檢測試劑盒 (CCK-8 法)是應用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細菌活性的比色檢測產(chǎn)品。

本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被細菌的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan，生成的Formazan 量與細菌的活性成正比。細菌活性越強，則顏色越深；細菌活性越弱，則顏色越淺。對于同樣的細菌，顏色的深淺和細菌活性呈線(xiàn)性關(guān)系。

CCK-8溶液可以直接加入到細菌樣品中，不需要預配各種成分，CCK-8溶液很穩定，對細菌沒(méi)有毒性，可以長(cháng)時(shí)間培養細菌。

儲存條件：2-8℃避光保存。長(cháng)期不用分裝后-20℃避光保存。避免反復凍融。

注意：

1．CCK-8短期存放于2-8℃，長(cháng)期存放請分裝后-20℃避光保存。

2．避免反復凍融。

3．凍存后溶解時(shí)注意重新混勻。

有效期：一年。