ATF-1轉錄因子抗體-1ELISA試劑盒

服務(wù)：

公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

試劑盒組成及試劑配制 ：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過(guò)氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過(guò)氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

樣品準備：

1）血清-----操作過(guò)程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

使用方法：

測定法的靈敏度來(lái)自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chǎn)生可供觀(guān)察的顯色反應現象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。

1. 標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)試劑盒谷氨單鈉鹽藍VF IndicatorCelite® 硅藻土545  助濾劑，碳鈉處理，通量煅燒

粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)試劑盒骨化二乙苯酯 99%Celite 硅藻土，洗 用于總膳食纖維含量分析, TDF-100A

腸三葉因子(ITF)試劑盒骨化二撲草凈 分析標準品，99%助濾劑，洗，碳鈉處理，通量煅燒

腸三葉因子(ITF)試劑盒瓜子金皂苷V撲草凈標準溶液 10μg/ml,u=6% 助濾劑，通量煅燒（filter aid, flux calcined）

Dickkopf 1(DKK1)試劑盒瓜子金皂苷己撲草凈標準溶液 100μg/ml,u=4%1-癸烯 95%

Dickkopf 1(DKK1)試劑盒關(guān)附素撲草凈 分析標準品，99.5%二正辛 97%

激肽釋放11(KLK 11)試劑盒 管花苷A聚乙二二烯酯 平均分子量 ~258 1-己烯 99%

激肽釋放11(KLK 11)試劑盒 光翠雀聚乙二二烯酯 平均分子量~5751-己烯 分析標準品，≥99.5% (GC)

生長(cháng)調節致癌因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)試劑盒 光萼野百合聚乙二二烯酯 平均分子量 ~700 1-己烯 97%

生長(cháng)調節致癌因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)試劑盒 光甘草定聚乙二烯酯 平均分子量 ~3001-己烯 Standard for GC

生長(cháng)調節致癌因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)試劑盒 廣防風(fēng)苷A聚乙二烯酯 平均分子量 ~475α-乙烯 99%

生長(cháng)調節致癌因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)試劑盒 廣藿香聚乙二烯酯 平均分子量~9501-辛烯 98%

美麗線(xiàn)蟲(chóng)凋亡因(CED-3)試劑盒 鬼臼素Mw 400,000-500,000 ,20 wt. %水溶液，800-1000 cP (25 °C) 2,4,4-三-1-戊烯 98%

美麗線(xiàn)蟲(chóng)凋亡因(CED-3)試劑盒 鬼臼素-4-O-葡萄糖苷鹽巴馬汀 97% 2,3-二-1,4-萘醌 98%

胸腺白血病抗原(TLa)試劑盒 哈巴俄苷N-苯-1-萘 98%2,3-二-1,4-萘醌 分析標準品

胸腺白血病抗原(TLa)試劑盒 哈巴苷異硫苯酯 99%, 蛋白測序級對氨苯 98%
ATF-1轉錄因子抗體-1ELISA試劑盒PKH67/PI 雙染細胞毒性檢測試劑盒是利用細胞熒光染料PKH67和PI對細胞進(jìn)行染色，利用PKH67標記靶細胞，PI標記死的靶細胞來(lái)區分不同的細胞，活的靶細胞成綠色，死的靶細胞成紅色和綠色，從而檢測細胞毒性作用。

根據不同的實(shí)驗方案設計，可以用來(lái)檢測化合物的細胞毒性作用。也可以用來(lái)檢測殺傷性T 細胞或NK 細胞介導的細胞毒作用。

熒光染料PKH67是一種可對活細胞進(jìn)行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞，通過(guò)與膜結構的脂質(zhì)分子結合而標記細胞。對細胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，有著(zhù)強而穩定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標記的細胞可用于體外和體內增殖研究，且具有不會(huì )使鄰近細胞染色的功能。

在細胞分裂增殖過(guò)程中，PKH67的熒光強度會(huì )隨著(zhù)細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標記細胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過(guò)程中，PKH67標記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過(guò)流式細胞儀根據熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次(1/2的熒光強度)，二次(1/4的熒光強度)，三次(1/8的熒光強度)，以及更多分裂次數的細胞。PKH67可檢測分裂次數多達六次甚至更多。

除了用于細胞增殖檢測，PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內示蹤，標記后熒光在胞內表達穩定，陽(yáng)性標記率達98%以上，標記細胞形態(tài)良好，能有效地觀(guān)察細胞在體外的誘導分化情況；或將標記的細胞注入體內，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。

PKH67標記的細胞用于體內觀(guān)察可以長(cháng)達數周之久，它常被用來(lái)做活體細胞檢測實(shí)驗和用熒光電鏡觀(guān)察細胞長(cháng)期活動(dòng)的實(shí)驗。PKH67 毒性較小，不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患?？梢愿焖?，更準確和更安全地得到想要的實(shí)驗數據。

PKH67/PI標記細胞后通常用流式細胞儀進(jìn)行細胞毒性檢測。

PKH67標記細胞呈綠色熒光，熒光波長(cháng)：λex=490 nm,λem=502 nm。流式檢測時(shí)的激發(fā)波長(cháng)可以選擇488nm，此時(shí)的發(fā)射波長(cháng)為502nm，使用流式細胞儀檢測時(shí)可以采用FL1 detection channel。PI標記細胞呈紅色熒光，流式檢測時(shí)的激發(fā)波長(cháng)可以選擇488nm，此時(shí)的發(fā)射波長(cháng)為647nm，使用流式細胞儀檢測時(shí)可以采用FL2 detection channel。

PKH67標記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞毒性外，還可單染后用于細胞增殖檢測，或者用熒光酶標板定量活細胞數目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細胞示蹤觀(guān)察。

儲存條件：-20℃避光保存。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準。