TAF腫瘤血管生長(cháng)因子ELISA試劑盒

試劑盒組成及試劑配制 ：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過(guò)氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過(guò)氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

服務(wù)：

公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

樣品準備：

1）血清-----操作過(guò)程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

使用方法：

測定法的靈敏度來(lái)自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chǎn)生可供觀(guān)察的顯色反應現象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。

1. 標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準。

抗鈣蛋白抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA it馬兜鈴C乙戊酯 CP,98.5% 丁位癸內酯 98%

抗鈣蛋白抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA it馬兜鈴茴香 98%鄰氨苯酯 98%

卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒馬來(lái)乙縮 CP,97%位癸內酯 98%

卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒馬錢(qián)乙縮 Standard for GC，>99%（GC)鄰氨苯酯 ≥98%, FCC, Kosher

抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)試劑盒 馬錢(qián)乙縮 98%正癸 98%

抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)試劑盒 買(mǎi)麻藤乙縮 ≥98%, FG1,4-二氧苯 99%

系統性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒 麥冬元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖茴香烯 99%一縮二 99%

系統性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒 麥冬黃烷A乙溶液 35 wt. % in H2O一縮二 98%

抗抗體(GM1)試劑盒麥冬內酯A位戊桂 97%癸 97%

抗抗體(GM1)試劑盒麥冬皂A楊梅 98%2,5-二吡 98%

抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)試劑盒 麥冬皂B乙戊酯 ≥99%丁位十二內酯 98%

抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)試劑盒 麥冬皂C2,3-丁二 98%乙癸酯  98%

抗中性粒顆?？贵w(ANGA)試劑盒麥冬皂D丁丁酯  Standard for GC, ≥99.5% (GC)乙二芐原酯 99%

抗中性粒顆?？贵w(ANGA)試劑盒麥冬皂D'丁丁酯  >99.0%(GC)乙二芐原酯 98%, FCC, Kosher

抗中性?？贵w(ANA)試劑盒 麥角甾苯芐酯 CP,98.0%2,6-二-2-庚 99%

抗中性?？贵w(ANA)試劑盒 麥芽糖苯芐酯  >99.0%(GC)癸乙酯 99%
TAF腫瘤血管生長(cháng)因子ELISA試劑盒本試劑盒適用于測定哺乳動(dòng)物組織、細胞caspase-5活性。試劑盒測定原理基于Caspase-5特異水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA)，釋放出游離的硝基pNA，后者呈黃色在405nm具有大吸收峰，用可見(jiàn)光分光光度比色方法測定，吸光度值對應于Caspase-5的水解活性。

細胞凋亡屬于程序化細胞死亡，可見(jiàn)于各種器官和細胞，在正常發(fā)育、生理、病理過(guò)程中對細胞和器官的穩態(tài)具有十分重要的調節作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細胞凋亡過(guò)程的蛋白酶家族，包含10多個(gè)成員。Caspase-5分子量47.7kD，與ICE有51%的同源性，在過(guò)量表達時(shí)可誘導凋亡發(fā)生。

所需儀器：酶標儀與96孔酶標板；或可見(jiàn)光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。

工作波長(cháng)：大吸收波長(cháng)405nm，如不具備也可在400～450nm范圍內測定。