H輔酶ⅠNAD測試劑盒微量法

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商品介紹：

測定意義
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要氫受體，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時(shí)，形成大量的ROS，同時(shí)NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說(shuō)明細胞呼吸耗氧量較高，處于過(guò)氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過(guò)PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測。
需自備的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、臺式離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

特點(diǎn)：
       1、優(yōu)化設計的實(shí)驗方案，1小時(shí)即可完成
       2、靈敏度高，操作便捷
       3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
 

常見(jiàn)樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備： 細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量
（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議 500萬(wàn)細菌或細胞加入 1mL提取液） ，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲 3s，間隔10s，重復30 次）8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時(shí)間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗臺上，以便 不時(shí)觀(guān)察，待對照管顯色適當時(shí)，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應步驟，但卻 是決定實(shí)驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

腦型肌酸激酶(CKB)天然蛋白    Native Creatine Kinase, Brain (CKB)     

糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)天然蛋白     Native Glycated Hemoglobin A1c (HbA1c)     

血紅蛋白(HB)天然蛋白     Native Hemoglobin (HB)      

免疫球蛋白G1(IgG1)天然蛋白     Native Immunoglobulin G1 (IgG1)     

免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白     Native Immunoglobulin G (IgG)     

免疫球蛋白G1(IgG1)天然蛋白     Native Immunoglobulin G1 (IgG1)     

ISL LIM同源框蛋白1(ISL1)天然蛋白     Native Ischemia Modified Albumin (IMA)     

ISL LIM同源框蛋白1(ISL1)天然蛋白     Native Ischemia Modified Albumin (IMA)     

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白     Native Carbonic Anhydrase II (CA2)     

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白     Native Carbonic Anhydrase II (CA2)     

癌胚抗原相關(guān)細胞粘附分子1(CEACAM1)天然蛋白     Native Carcinoembryonic Antigen Related Cell Adhesion Molecule 1 (CEACAM1)     

肌肌酸激酶(CKM)天然蛋白     Native Creatine Kinase, Muscle (CKM)     

肌紅蛋白(MYO)天然蛋白     Native Myoglobin (MYO)     

轉鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白     Native Transferrin Receptor (TFR)     

107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白    Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)    

10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP10)重組蛋白    Recombinant Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)    

188kDa核孔蛋白(NUP188)重組蛋白    Recombinant Nucleoporin 188kDa (NUP188)    

1號染色體開(kāi)放閱讀框85(C1orf85)重組蛋白    Recombinant Chromosome 1 Open Reading Frame 85 (C1orf85)    

35kDa核孔蛋白(NUP35)重組蛋白    Recombinant Nucleoporin 35kDa (NUP35)    

ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白    Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)    

70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)重組蛋白    Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)    

Adropin蛋白(AD)重組蛋白    Recombinant Adropin (AD)    

ATP結合盒轉運蛋白G1(ABCG1)重組蛋白    Recombinant ATP Binding Cassette Transporter G1 (ABCG1)    

beta Amyloid 31-35    β淀粉樣肽（31-35)/Aβ 31-35 抗體    

beta-Amyloid 1-40(CT)    β淀粉樣肽 1-40（C端）抗體    

Beta arrestin 2    β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體    

Anthrax    炭疽桿菌抗體    

ACD    腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體    

Angiotensin II type 1A receptor    血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體    

ABI1    ABI1/SSH3BP1蛋白抗體    

Acetyl-Histone H1.4 (K53)    乙?；M蛋白H1b抗體    

phospho-Androgen Receptor (Ser578)    磷酸化雄激素受體抗體    

APE1    多功能DNA修復酶抗體    

AAK1    AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體    

AQP1    水通道蛋白1抗體    

AATK    AATK細胞凋亡關(guān)聯(lián)酶抗體    

H輔酶ⅠNAD測試劑盒微量法ABCB5    ATP結合蛋白家族5抗體    

APNG    N-甲基嘌呤DNA糖基化酶    

AU5 tag    AU5 tag標簽抗體    

注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。