FBN1原纖維蛋白-1ELISA試劑盒

樣品準備：

1）血清-----操作過(guò)程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

服務(wù)：

公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

使用方法：

測定法的靈敏度來(lái)自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chǎn)生可供觀(guān)察的顯色反應現象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。

1. 標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準。

試劑盒組成及試劑配制 ：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過(guò)氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過(guò)氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

血管活性肽抑制劑(VPI)試劑盒 阿福豆苯乙 CP,98%硬脂鎘 AR

血管活性肽抑制劑(VPI)試劑盒 阿江欖仁苯乙  GR,≥99.0% (GC)硫化亞鐵 Fe,60.0 - 72.0 %

心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)試劑盒 阿里辛，馬蹄葉，阿立新 異佛爾二 99%硬酯鉛 AR

心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)試劑盒 ，顛茄乙酰乙烯乙酯 95% Standard for GC

缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒 埃奇烯酰 AR,99.0%化鎳 CP,98.0%

缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒 矮陀陀 A己二二酰肼 98%化鎳 anhydrous, 99.99% metals basis

8-異構前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)試劑盒矮陀陀酰 A正丁 AR，98.5%苯肼 AR,98.0%

8-異構前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)試劑盒艾納香素1，4-丁二 99%苦 AR

血管內皮鈣粘著(zhù)蛋白復合體(VE-cad)試劑盒艾納香素 B二乙二丁  99% CP，99.0%（劇品）

血管內皮鈣粘著(zhù)蛋白復合體(VE-cad)試劑盒桉樹(shù)腦二乙二丁 CP GR,99.8%

α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)試劑盒 桉樹(shù)素1,3-丁二 99% 99.995%

α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)試劑盒 烯1,3-丁二 分析標準品玫瑰紅 Indicator

α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)試劑盒桉脂素1,3-丁二 98%過(guò)氧化鈉 95%

α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)試劑盒奧多諾甙 H三硅烷 Wacker quality, ≥99.0% (GC)高鈉 ACS, 99.8-100.3%

平滑肌肌球蛋白(SMM)試劑盒 奧洛波爾二  ≥99.0%(GC)亞硝鈷鈉 AR,Co 13.5～14.5%

平滑肌肌球蛋白(SMM)試劑盒 奧沙京正十二硫 98%偏鋁鈉 AR
FBN1原纖維蛋白-1ELISA試劑盒DAPI（4,6-Diamidino-2-phenylindole ，4,6-二氨基-2-苯基吲哚）是一種DNA 特異性染料，與DNA產(chǎn)生非嵌入式結合，發(fā)出藍色熒光。該染料對細胞膜有半通透性，可透過(guò)正?；罴毎a(chǎn)生較弱的藍色熒光（細胞固定后熒光增強），而凋亡細胞的膜通透性增加，對其攝取能力增強，產(chǎn)生很強藍光染色。

正常細胞的核形態(tài)呈圓形，邊緣清晰，染色均勻，而凋亡細胞的細胞核邊緣不規則，細胞核染色體濃集，著(zhù)色較重，并伴有細胞核固縮，核小體碎片增加，因此從熒光強度及核形態(tài)均可鑒別出細胞發(fā)生凋亡的典型特征。

操作方法（本方法針對貼壁細胞，但不僅限于貼壁細胞）

1. 貼壁培養的細胞爬片棄去培養基，10mM PBS，pH7.4，洗一次；

2. 再滴加入100μL 的DAPI 染液，室溫避光染色5-15 min；

3. 棄去染色液，PBS 漂洗一次，

4. 滴加甘油或Buffer A，熒光顯微鏡以340/380nm 紫外光激發(fā)，500×（40×12.5）（好是100×油鏡頭）觀(guān)察、拍照。

儲存：2-8℃，避光，有效期6個(gè)月。