熒光-PCR法的相關(guān)數據處理常識要弄清

實(shí)時(shí)熒光-PCR法是在DNA擴增反應中，以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的技術(shù)。它通過(guò)內參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析。實(shí)時(shí)熒光定量PCR是在PCR定性技術(shù)基礎上發(fā)展起來(lái)的核酸定量技術(shù)。對熒光-PCR法的數據處理我們要了解一個(gè)關(guān)鍵的因素“Ct值”。在實(shí)時(shí)定量PCR的數據圖中，x-軸表示PCR循環(huán)數，y-軸表示擴增反應的熒光值，也就是擴增產(chǎn)物的量。這個(gè)圖中有基線(xiàn)、閾值、Ct值這幾個(gè)概念，從這幾個(gè)值我們能夠最終得到模板中目的基因的含...

紅色毛癬菌LAMP試劑盒反應五要素

紅色毛癬菌LAMP試劑盒反應五要素：參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：①引物長(cháng)度：15-30bp，常用為20bp左右。②引物擴增跨度：以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長(cháng)至10kb的片段。③引物堿基：G+C含量...

綿羊補體片段3b受體ELISA試劑盒洗滌方法

綿羊補體片段3b受體ELISA試劑盒洗滌方法：1.自動(dòng)洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。2.手工洗板：甩盡孔內液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。實(shí)驗開(kāi)始前，各試劑均應平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意...

大巴貝蟲(chóng)探針?lè )晒釶CR檢測試劑盒注意事項

大巴貝蟲(chóng)探針?lè )晒釶CR檢測試劑盒注意事項:１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設立一個(gè)專(zhuān)用的PCR實(shí)驗室。２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。３．所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)...

核酸檢測試劑盒檢測時(shí)的RT-PCR原理講解

核酸檢測試劑盒里面裝的是核酸檢測的試劑，但是試劑盒它本身并不能檢測病毒，它是給檢測病毒的儀器設備提供的試劑和耗材。由于相應學(xué)科的發(fā)展，使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展，從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò )合物和各種表面活性劑的應用研究，使許多元素的摩爾吸光系數由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對于其它痕量分析方法而言，光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用，在標準參考物質(zhì)的研制中，它更受重視，很多光度分析法已制定成為標準...

人美洲商陸素（PWM）ELISA免費代測試劑盒?操作步驟

人美洲商陸素（PWM）ELISA免費代測試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中...

兔腎素(Renin)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項

兔腎素(Renin)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀...

人間變性淋巴瘤激酶（ALK）ELISA免費代測試劑盒?操作步驟

人間變性淋巴瘤激酶（ALK）ELISA免費代測試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第...